青海弧菌荧光素酶的异源表达条件的优化

作者: 李璠丁武彭国霞王妍稳张莉丽

关键词: 青海弧菌荧光素酶优化生物发光

摘要：生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中.本研究通过CaC12方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化.单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1％,IPTG浓度0.1 mmol/L,装液量50 mL/150 mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高.正交试验结果表明:当pH 6,IPrG浓度0.08 mmol/L,接种量1.2％,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1 262.7.本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据.

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青海弧菌荧光素酶的异源表达条件的优化

作者: 李璠 丁武 彭国霞 王妍稳 张莉丽

关键词: 青海弧菌 荧光素酶 优化 生物发光

作者: 李璠丁武彭国霞王妍稳张莉丽

关键词: 青海弧菌荧光素酶优化生物发光