胡萝卜中过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶特性及抑制条件的研究

摘要：经硫酸铵分级沉淀、SephadexG-100凝胶过滤层析纯化,得到部分纯化的胡萝卜过氧化物酶（POD）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）。这两种酶的纯化倍数分别为7.44倍和5.87倍,回收率分别为32.51%和5.06%。酶学性质和动力学性质研究表明,胡萝卜POD和PAL的最适pH分别为5.0和8.4;在不同pH值下POD和PAL的活力及其耐受性变化趋势相似。POD的适宜温度为30℃,当温度40～50℃时,PAL酶活力达到最高点。PAL酶液体积为1.6mL时,反应速度最快;而POD酶液体积分别为1.0mL和1.6mL时,反应速度出现峰值。当POD和PAL底物浓度分别为44.8×10-6mol/L和0.02mol/L时,反应速度达到最大值。Na＋、10mmol/LCa2＋、0.1mmol/LNH4＋、Mg2＋可以同时显著地（P〈0.05）抑制胡萝卜POD和PAL酶的活力。胡萝卜POD与愈创木酚的亲合力强,PAL与L-苯丙氨酸的亲合力较小。