疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定

作者: 蔡海莺 [1] 张婷 [2] Dumba Trish [2] 赵敏洁 [3] 李杨 [3] 童志超 [3] 毛建卫 [2] 张辉

关键词: 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶重组表达密码子优化性质鉴定 sn-1 3位置专一性毕赤酵母

摘要：通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体pPIC9K中.结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/mL,对应的pNPP水解酶活达到312.72U/mL.与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/mL)相比,密码子优化后酶活提高74.29％,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达.比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适pH和温度耐受范围.另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力.

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疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定

作者: 蔡海莺 [1] 张婷 [2] Dumba Trish [2] 赵敏洁 [3] 李杨 [3] 童志超 [3] 毛建卫 [2] 张辉

关键词: 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶 重组表达 密码子优化 性质鉴定 sn-1 3位置专一性 毕赤酵母

关键词: 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶重组表达密码子优化性质鉴定 sn-1 3位置专一性毕赤酵母